痰液、體液、糞便等組織樣本是常用的微生物學(xué)檢驗樣本,常含有多種微生物成分,
且自身成分復(fù)雜。由于結(jié)核分歧桿菌對營養(yǎng)的要求高、生長緩慢,培養(yǎng)時若標本中含有其他
雜菌,雜菌一般生長較快、易消耗營養(yǎng),不利于結(jié)核分歧桿菌的檢出。因此對于可能含有雜
菌的樣本(如痰標本、消化道標本、支氣管肺泡灌洗液和經(jīng)支氣管吸出液等),培養(yǎng)前均需
要對其進行前處理以液化標本、殺死雜菌。尿液、尸檢組織和其他任何污染的液體標本,均
在培養(yǎng)前進行去污處理,而血、腦脊液、關(guān)節(jié)液等來自機體無菌部位的無雜菌污染的標本,
可以直接離心后取沉淀接種。
常用的標本前處理消化試劑有硫酸、氫氧化鈉、N-乙酰-L-半胱氨酸(NALC)、苯扎溴銨、草酸、胰酶、二硫蘇糖醇等。痰消化液(胰酶消化法)主要由胰蛋白酶和磷酸鹽等組成,ph為 7.6,經(jīng)無菌處理,是痰液樣本均質(zhì)化操作的常用方法。本產(chǎn)品僅供科研使用。
痰消化液自備材料:
1、痰液、體液、糞便等組織樣本
2、生理鹽水、PBS
3、接種環(huán)
4、離心管、離心機
5、培養(yǎng)基
6、剪刀、研缽
痰消化液操作步驟(僅供參考):
(一)痰液樣本:
1、挑起約 5ml濃痰液至已標記的 50ml離心管中。
2、加入等量的痰消化液進行均質(zhì)化處理,渦旋震蕩 20s,30-37℃靜置 15-20min。
3、加入無菌 PBS(pH6.8 左右)至約 50ml,3000r/min 離心 15min。
4、倒掉上清液,添加 PBS1~3ml 。
(二)體液樣本:
1、 無菌體液直接接種。取 10ml 體液于離心管中離心,取沉淀物直接接種。
2、 污染的體液操作同痰液標本。
(三)組織樣本:
取 1g 組織用剪刀剪碎加入 5ml 培養(yǎng)基,用研缽將組織制作成勻漿,加入 50ml離心管
中。以下操作同痰液標本。
(四)糞便樣本:
取 1g 糞便加入到 50ml離心管中,并向其中加入 5ml培養(yǎng)基,混勻。以下操作同痰液
標本。
痰消化液注意事項:
1、 痰液樣本易在清晨采集,采集前先以冷開水充分漱口,以免口腔正常菌群污染樣本。
2、 尿液樣本易收集早晨第一次尿的中段尿為宜。
3、 樣本采集后應(yīng)立即送檢。
4、 如樣本用于結(jié)合桿菌的檢查,痰量要多。
5、 肺部感染的樣本可能患有菌血癥,應(yīng)同時做血液培養(yǎng)。
有效期: 12 個月有效。-20℃保存。4℃可短期保存。
原創(chuàng)作者:青島捷世康生物科技有限公司