藥物與血漿蛋白的結(jié)合

游離型藥物和結(jié)合型藥物

處于生物樣品中的藥物，并不等于藥物同生物材料簡(jiǎn)單的結(jié)合。藥物在體內(nèi)經(jīng)代謝生成代謝物，藥物與代謝物又可同蛋白結(jié)合，如在血液中與血漿蛋白結(jié)合。一般認(rèn)為，這種結(jié)合是通過非共價(jià)鍵力，即依靠范德華力、氫鍵、離子間的靜電力以及生成電荷轉(zhuǎn)移絡(luò)合物等。這是一個(gè)可逆過程，離解速度是很快的，可用質(zhì)量作用定律來表示，即存在吸附和解吸附平衡：   D+P⇆DP

式中：D代表藥物或代謝物，P代表血漿蛋白，DP代表藥物-血漿蛋白結(jié)合物。與藥物相結(jié)合的血漿蛋白，通常是白蛋白。近年來研究發(fā)現(xiàn)：有機(jī)酸類藥物主要是與白蛋白相結(jié)合，而有機(jī)堿類藥物則主要同酸性糖蛋白結(jié)合。藥物與血漿蛋白結(jié)合是一種力的效應(yīng)，結(jié)合的強(qiáng)弱及結(jié)合的程度與藥物的化學(xué)機(jī)構(gòu)有關(guān)，有的藥物血漿蛋白結(jié)合率低，而有的藥物與血漿蛋白結(jié)合率就很高。因此，從藥物的體內(nèi)代謝及藥物與血漿蛋白結(jié)合兩方面來考慮，血液中存在游離的藥物和游離的代謝物，也存在與血漿蛋白相結(jié)合的藥物和代謝物，縱然有高的血藥濃度，但可揮發(fā)作用的游離藥物水平并不高。藥理作用并不一定強(qiáng)。因此，對(duì)于一個(gè)臨床使用的藥物或正在研制的新藥，若沒有血漿蛋白結(jié)合方面的資料，就不可能評(píng)價(jià)血藥濃度的真實(shí)意義。

藥物血漿蛋白結(jié)合率時(shí)藥代動(dòng)力學(xué)的中藥參數(shù)之一，為很多書籍和手冊(cè)所收載，并使新藥臨床評(píng)價(jià)不可缺少的指標(biāo)。因?yàn)檫@種結(jié)合的程度和幾何的親和性，將影響藥物在體內(nèi)的分布。游離藥物在血漿中的濃度能夠影響藥物的排泄和代謝速率，對(duì)藥物消除半衰期也可能產(chǎn)生應(yīng)先。例如，與利福平相比，環(huán)戊基哌嗪力復(fù)霉素的抗菌作用顯著延長(zhǎng)，這同它的血漿蛋白結(jié)合率高、半衰期長(zhǎng)有一定關(guān)系。設(shè)計(jì)給藥方案時(shí)，也應(yīng)當(dāng)考慮藥物血漿蛋白結(jié)合率的高低。

與血漿蛋白結(jié)合的藥物，可視為藥物的貯存庫(kù)。與面議分析中藥物（半抗原）和抗體的結(jié)合相比，藥物與血漿蛋白的結(jié)合不是特異性的，血漿蛋白與很多藥物都能結(jié)合，只是存在親和性強(qiáng)弱的差別，具體表現(xiàn)為藥物血漿蛋白結(jié)合率的高低及結(jié)合物的穩(wěn)定性，但這種結(jié)合缺乏選擇性和特異性。

基于這一性質(zhì)，許多藥物都能同血漿蛋白結(jié)合合并發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)，結(jié)合率高的可置換結(jié)合率低的，致使原被結(jié)合的藥物（結(jié)合率低者）大兩倍游離，使藥效顯著增加，這就是人們熟悉的“通過競(jìng)爭(zhēng)血漿蛋白結(jié)合產(chǎn)生的藥物間互相作用”。

目前，測(cè)定藥物血漿蛋白結(jié)合率的方法主要是平衡透析法（equilibrium dialysis)和超濾法，最常用的為平衡透析法。

平衡透析法是利用半透膜的作用，分子量小的游離藥物可自由地通過半透膜，而血漿蛋白及血漿蛋白結(jié)合的藥物卻不能通過半透膜。平衡透析法的簡(jiǎn)單操作如下；取一只廣口瓶，內(nèi)盛透析液（溶有被測(cè)藥物），透析液一般用緩沖液控制到生理PH（ph7.4）。另取一管狀透析袋，扎緊下端，加入適量血漿或血清于袋內(nèi)，在扎緊上段。將此透析袋放入上述光口瓶中，使袋內(nèi)、袋外溶液面保持同一高度，在不斷攪拌下，藥物可通過半透膜緩緩進(jìn)入袋內(nèi)與血漿蛋白相結(jié)合，并達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡、這一過程一般需要幾十小時(shí)的時(shí)間（具體由實(shí)驗(yàn)確定）。當(dāng)達(dá)到平衡后，袋內(nèi)溶液中的藥物包括游離藥物和血漿蛋白結(jié)合的藥物兩部分，而其中游離藥物的濃度由于袋外游離藥物濃度相等。用適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)測(cè)定法或儀器測(cè)定法測(cè)定袋外溶液中藥物濃度和袋內(nèi)溶液中藥物的總濃度，二者之差即為血漿蛋白結(jié)合的藥物兩，由此可計(jì)算出被測(cè)藥物的血漿蛋白結(jié)合率。

下面用磺胺類藥物為實(shí)例說明藥物血漿蛋白結(jié)合率測(cè)定過程；磺胺類藥物與血漿蛋白結(jié)合之后，會(huì)影響其抗菌作用。因此，設(shè)計(jì)給藥方案時(shí)應(yīng)當(dāng)考慮個(gè)藥物血漿蛋白結(jié)合率的高低�；前奉愃幬锏难獫{蛋白結(jié)合率與藥物的種類，個(gè)體血漿成分。種屬以及肝、腎功能有關(guān)。中國(guó)人正常血清蛋白與磺胺類藥物的結(jié)合率如下：磺胺異噁唑?yàn)?1.3%,磺胺嘧啶為48.7%。測(cè)定時(shí)選用管狀人工半透膜（周長(zhǎng)為5cm，長(zhǎng)為12cm），用0.2M磷酸鹽緩沖液（內(nèi)含0.15M NaCl)作為透析液（PH7.4),強(qiáng)血清或血漿（血漿系靜脈取血后經(jīng)肝素抗凝在離心獲得）置袋內(nèi)，扎緊透析袋兩端，放入廣口瓶中（廣口瓶?jī)?nèi)預(yù)先盛透析液適量，內(nèi)含被測(cè)磺胺藥物）。將廣口瓶置于冰箱中平衡透析60小時(shí)，使擴(kuò)散平衡。然后分別取等量袋內(nèi)、袋外溶液，用重氮化法測(cè)定磺胺藥物的含量。按下式計(jì)算藥物血漿蛋白融合率：

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