細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒試驗(yàn)

點(diǎn)擊次數(shù)：1096　日期：2016/8/8 8:46:46

細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒試驗(yàn)

細(xì)胞毒是細(xì)胞介導(dǎo)免疫的主要效應(yīng)之一，是機(jī)體的一種免疫監(jiān)督機(jī)制，因此，細(xì)胞毒試驗(yàn)（包括NK，ADCC，LAK，TIL，CTL等）是一項(xiàng)重要的免疫指標(biāo)。傳統(tǒng)的同位素示蹤、染料排斥、熒光法等都有同位素污染、人為因素影響等缺點(diǎn)。FCM法綜合了上述常規(guī)法的優(yōu)點(diǎn)，越來越引起臨床醫(yī)學(xué)家的重視。

碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）染料排斥法利用PI可以滲透到死細(xì)胞內(nèi)使核染色的特點(diǎn)，用FCM分析死亡靶細(xì)胞比例。此方法還有一個(gè)⁵¹Cr釋放法不能比擬的長處，即不但可以測定單次細(xì)胞毒試驗(yàn)（SCCA），也可以觀察NK細(xì)胞的再循環(huán)殺傷作用，即：效應(yīng)細(xì)胞殺死一個(gè)靶細(xì)胞后，可再殺傷其他細(xì)胞的能力，稱之總細(xì)胞毒試驗(yàn)（TCCA）。

FDA-FCM試驗(yàn) 基本原理同PI排斥法，但它同前者相反，是以熒光染料FDA在活細(xì)胞內(nèi)滯留，以計(jì)算活細(xì)胞數(shù)為基礎(chǔ)。FDA可以穿通活的細(xì)胞膜進(jìn)入胞內(nèi)，受胞內(nèi)脂酶水解，產(chǎn)生熒光物質(zhì)留于胞內(nèi)；細(xì)胞受殺傷時(shí)，染料排出，以確定殺傷效應(yīng)。

細(xì)胞光掃描法通過靶細(xì)胞受效應(yīng)細(xì)胞殺傷后發(fā)生形態(tài)的改變及光掃描特性變化，在排除效應(yīng)細(xì)胞群體后，用特設(shè)的閾值把死活的兩群靶細(xì)胞分開，計(jì)算殺傷效應(yīng)。

也有學(xué)者用雙標(biāo)記細(xì)胞毒法，即用綠熒光色素標(biāo)記效應(yīng)細(xì)胞，用紅色熒光素標(biāo)記靶細(xì)胞，在細(xì)胞裂解前，用FCM定量測定效應(yīng)細(xì)胞和靶細(xì)胞的結(jié)合體形成。

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